Caractérisation de la localisation intracellulaire affectée par les mutations génétiques rares dans le gène codant pour l’ubiquitine ligase RNF13

Valerie C. Cabana^{a, b} et Marc P. Lussier^{a, b}

^aDépartement de Chimie, Faculté des sciences, Université du Québec à Montréal, Montréal, QC, Canada
^bCentre d’Excellence en Recherche sur les Maladies Orphelines, Fondation Courtois (CERMO-FC), Faculté des sciences, Université du Québec à Montréal, Montréal, QC, Canada

L’encéphalopathie épileptique infantile précoce (EIEE) est une forme rare et très grave d’épilepsie caractérisée par une microcéphalie, de l’épilepsie sévère avec crises réfractaires ainsi qu’une profonde déficience intellectuelle. Identifiée en 2019, l’EIEE73 est causée par les variantes génétiques de RNF13 qui encodent pour les protéines mutantes L311S et L312P. RNF13 est une ubiquitine ligase transmembranaire dont l’activité et la fonction ne sont pas encore bien définies. En transfectant des cellules HELA avec les constructions plasmidiques encodant pour la protéine sauvage de RNF13 (WT) ainsi que les deux mutants causant EIEE73 (L311S et L312P), nous avons découvert que la protéine WT se localise au niveau du système endolysosomal alors que les protéines mutantes ont une localisation aberrante. De plus, nous avons découvert que les protéines mutantes causent une altération de la morphologie des vésicules de la voie endolysosomale. En effet, les vésicules des endosomes précoces et tardifs ainsi que les lysosomes ont un diamètre significativement plus gros en présence des protéines mutantes comparativement à la protéine sauvage. À l’inverse, les endosomes de recyclage vers le trans-Golgi ont un diamètre significativement plus petit lorsque les protéines mutantes sont surexprimées. Les résultats suggèrent donc que les protéines mutantes L311S et L312P ont un impact sur la régulation de la taille des vésicules du système endolysosomal. Bien que ces résultats apportent une meilleure compréhension des mécanismes cellulaires affectés par les mutations génétiques dans le gène codant pour RNF13, d’autres études seront nécessaires pour déterminer le rôle exact de la protéine dans le système endolysosomal.